GTPase-Glo Assay

GTPase-Glo Assay vurderer aktivitetene til GTPaser, GAPer og GEFer, som er komponenter i GTPase-syklusen, ved å detektere mengden GTP som gjenstår etter GTP-hydrolyse i en GTPase-reaksjon. GTP som gjenstår, konverteres til ATP ved hjelp av GTPase-Glo Reagent, og ATP detekteres ved bruk av en proprietær varmestabil luciferase (Ultra-Glo recombinant luciferase) og luciferin substrat for å produsere bioluminescens. Settet inneholder optimaliserte reaksjonsbuffere, GTPase/GAP-Buffer og GEF-Buffer, for utførelse av henholdsvis GTPase- og GAP-reaksjoner samt GEF-reaksjoner. Disse to buffere skiller seg hovedsakelig i sitt Mg2+-innhold, noe som er avgjørende for nukleotidbelastning og -avlastning av GTPasen og dermed påvirker GTPase-syklusen. Med denne analysen kan du måle intrinsisk GTPase-aktivitet, GAP-stimulert GTPase-aktivitet, GAP-aktivitet og GEF-aktivitet. GTPase-, GAP- og GEF-aktivitet er omvendt proporsjonal med mengden lys som produseres.