


Promega
pBIND-GR Vector
Kjerneanalysen kan utføres ved tradisjonelle metoder ved hjelp av en minimal promotervektor med kjernereceptorresponsenheter oppstrøms. Eller du kan bruke virale elementer som mus mammary tumor virus long terminal repeat-promoteren for å vurdere androgen- eller glukokortikoidresponsene (f.eks. pGL4.36). I mange tilfeller krever disse metodene en cellelinje med de passende endogene kjernereceptorene, slik at du kanskje trenger forskjellige cellelinjer for hvert kjernereceptorstudie. En metode som bruker prinsippene til gjærto-hybrid-systemet ble tilpasset for kjernereceptorarbeidet. Kjernereceptorens ligandbindingsdomene er fusjonert til GAL4 DNA-bindingsdomenet og transfektert med en ildflue luciferasevektor som inneholder repetisjoner av GAL4-aktiveringssekvensen oppstrøms fra en minimal promotere. Ligandbindingsdomenet er ansvarlig for binding, dimerisering og interaksjoner med kofaktor eller korepressor. Den ene-hybridmetoden tillater arbeid med hvilken som helst cellelinje og kjernereceptor du måtte ønske.