PDK1 Kinase Enzyme System

Full-lengde rhPDK1 ble uttrykt av baculovirus i Sf9 insektceller med en N-terminal His-tag. PDK1 (3-fosfoinositolavhengig protein kinase) aktiveres av tilstedeværelsen av PtdIns(3,4,5)P3 eller PtdIns(3,4)P2. PDK1 aktiverer deretter protein kinase B (PKB), som igjen inaktiverer glykogen syntase kinase-3 (GSK3). Fosforylering av andre proteiner av PKB og GSK3 antas å mediere mange av insulinets intracellulære virkninger. Dermed spiller PDK1 en viktig rolle i å formidle mange av handlingene til andre budbringere PtdIns(3,4,5)P3 og PtdIns(3,4)P2. Menneskelig PDK1 har en katalytisk domene som ligner mest på PKA, PKB og PKC-underfamilien av protein kinaser. Systemet inneholder: PDK1, 10 μg (menneskelig, rekombinant full-lengde). MW: ~67 kDa. Substrat: PDKtide (KTFCGTPEYLAPEVRREPRILSEEEQEMFRDFDYIADWC); avledet fra to humane proteiner: rester 1-14 basert på AKT1 (307-320) og rester 16-39 basert på PKN2/PRK2 (961-984). Reaksjonsbuffer: DTT. PDK1 NCBI Database Entry: www.ncbi.nlm.nih.gov/gene/5170/.