TNT SP6 Quick Coupled Transcription/Translation System

Den TNT Quick Systems er praktiske enkelttube-koblede transkripsjon/oversettelsesreaksjoner for eukaryot cellefri proteinekspressjon. Disse cellefrie uttrykkssystemene kombinerer RNA-polymerase, nukleotider, salter, aminosyrer og rekombinant RNasin Ribonuclease-inhibitor med retikulocyt-lysatløsningen for å danne en enkelt TNT Quick Master Mix. TNT Quick Coupled Transcription/Translation System er tilgjengelig i to konfigurasjoner for uttrykk av gener klonet nedstrøms fra enten T7- eller SP6-RNA-polymerase-promotorer. For å bruke disse cellefrie uttrykkssystemene, tilsettes 0,2-2,0 ug sirkulær plasmid-DNA som inneholder en T7- eller SP6-promotor, eller et PCR-generert fragment som inneholder en T7-promotor, til en prøve av TNT Quick Master Mix og inkuberes i et reaksjonsvolum på 50ul i 60-90 minutter ved 30 grader C. Uttrykksreaksjonen produserer betydelige mengder protein til en rekke bruksområder, inkludert GST pull-downs og gel shift analyser.