HDAC-Glo I/II Assay

HDAC-Glo I/II Analyser og screeningssystem er homogene, luminescerende analyser som måler relative aktiviteten til histondeacetylas (HDAC) klasse I og II enzymer fra celler, ekstrakter eller rensede enzymkilder. Analyser bruker et acetylet, live-celle-gjennomtrengelig, luminogent peptid substrat som kan deacetyleres av HDAC-aktiviteter. Deacetylering av peptidaminoluciferinsubstratet måles ved bruk av et koblet enzymatisk system der et protease i utviklerreagentiet kløyver deacetylering av peptidet fra aminoluciferinsubstratet, frigjør aminoluciferin, som kvantifiseres i en reaksjon ved bruk av Ultra-Glo rekomptant ildflue luciferase. Analysereaksjonen er typisk fullført innen 15-45 minutter uten prøvebehandling. HDAC-mediert luminescerende signal er vedvarende, med en halveringstid på over 3 timer, som tillater partiell prosessering av multibrønnplater. HDAC-analysen er bredt anvendelig for klasse I og II enzymer.