ApoTox-Glo Triplex Assay

ApoTox-Glo Triplex-analyse kombinerer tre analysekjemi for å enkelt vurdere levedyktighet, cytotoxicitet og apoptosehendelser i samme cellebaserte analysebrønn. Først bestemmes levedyktighet og cytotoxicitet ved å måle to differensielle protease biomarkører samtidig med tilsetning av et enkelt ikke-lytisk reagens som inneholder to peptidsubstrater. Forholdet mellom levedyktige celler til døde celler er uavhengig av celletall og kan derfor brukes til å normalisere data. Et andre reagens som inneholder luminogent DEVD-peptidsubstrat for caspase-3/7 og Ultra-Glo rekombinant termostabil luciferase tilsettes. Caspase-3/7 spaltning av substratet frigjør luciferin, som er et substrat for luciferase og genererer lys. Lysets utgang, målt med en luminometer, korrelerer med aktivering av caspase-3/7 som en nøkkelindikator for apoptose.